代谢molomstechniques.

代谢组学技术概述

2019年7月22日 离开 经过 行政

代谢组合技术
有多种技术用于代谢物用于代谢物分析。每种技术都有其优点和缺点。因此,必须使用不同分析技术的组合来获得组织代谢的广阔视角。 NMR,气相色谱 - 质谱(GC-MS),液相色谱 - 质谱(LC-MS)和毛细管电泳 - 质谱(CE-MS)最常使用技术。

对于代谢组学研究,NMR非常适合,因为它可以唯一地识别并同时量化微摩尔范围内的各种有机化合物。与MS不同,样品可以继续进一步分析,因为NMR是非破坏性的。 NMR的样品制备是简单的并且在很大程度上自动化。然而,复杂混合物的NMR光谱的分析传统上已经充满了困难。 NMR已广泛用于代谢物指纹,分析和代谢通量分析。敏感性低,使其不适合对大量低丰度代谢物的分析成为NMR用于综合代谢物分析的主要限制。

MS已成为许多代谢组研究中的选择技术,因为它具有高灵敏度和覆盖的代谢物。通过直喷式MS或以下色谱或电泳分离,MS可用于分析生物样品。最近的新型分析仪的发展以及质量准确性的改善显着扩展了MS可以分析的代谢物的范围,并改善了化合物鉴定的准确性。最近的新型分析仪的发展以及质量准确性的改善显着扩展了MS可以分析的代谢物的范围,并改善了化合物鉴定的准确性。在直喷MS中使用高分辨率质谱仪时,它提供了一种非常快速的技术来分析大量代谢物,因此广泛用于代谢指纹识别和代谢物分析。

代谢molomstechniques.
与电子撞击(EI)四极或飞行时间(TOF)MS(GC-MS)加上的气相色谱是目前最成熟的新代谢物分析的技术。超过25年前,开发了自动化GC-MS代谢分析的概念,后来被用作代谢组科的主要技术。使用这种方法,可以同时概况几百种化学多样化的化合物,包括有机酸,大多数氨基酸,糖,糖醇,芳族胺和脂肪酸。通过GC-MS,可以直接分离和量化挥发性代谢物。对于其他方式,化学衍生化是必需的,使它们适用于GC-MS分析。尽管化学衍生化在许多化合物的GC分离中提供了显着的改善,但它也可以引起由于衍生过程本身而引入伪影。

由于其高灵敏度和分析物极性的范围和比GC-MS的分子质量宽,LC-MS越来越多地用于代谢组应用。液相色谱和特异性高效液相色谱(HPLC),称为成熟技术,其结合了高分辨率和分析柔性,因为它可以针对特定代谢物或类化合物的分析量身定制。许多用于广泛代谢物的应用已经存在或可以与MS组合使用LC转换为使用LC。

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事实上,CE-MS是与GC-MS和LC-MS相比的相对近期的技术,它成为代谢组学的主要分析技术之一。它具有非常高的分辨率,具有100 000-1000000 000的板号,非常小的样品要求,平均注射体积范围为1至20 nL,以及短的分析时间。对于对代谢物的靶向和非靶向分析,CE已经使用。包括分析无机离子,有机酸,氨基酸,核苷酸和核苷,维生素,硫醇,碳水化合物和肽。

参考:
Xie, J., Zhang, A., &王,X.(2017)。肝细胞癌中的代谢组应用:通过小分子探索治疗方法和诊断。 RSC推进,7(28),17217-17226。

//en.wikipedia.org/wiki/Metabolomics